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问：免疫荧光实验如何进行染色观察？
答：取不同分化阶段的细胞，经4％多聚甲醛室温固定15min；0 5％Triton X-100 PBS透膜10min；用2％牛血清白蛋白37℃孵育30min；加入2％BSA2026-06-22
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问：全细胞裂解液蛋白质印迹如何检测？
用冰预冷的PBS将细胞洗涤2次，刮取细胞至Eppendorf管中，5000r min离心5min收集沉淀；加入预冷的裂解缓冲液重悬细胞。2026-06-22
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问：P19细胞培养及诱导分化如何实施？
P19细胞未分化阶段，采用含10％FBS、1％双抗的α-MEM培养基常规培养。2026-06-22
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问：BrachyuryT-GFP质粒转染如何观察定位变化？
293T细胞培养于含有10％胎牛血清、1％双抗的Dulbecco改良Eagle培养基。2026-06-22
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问：BrachyuryT如何促进Wnt3a表达？
本研究也构建了Brachyury T-GFP融合蛋白质粒。转染293T细胞后加CHIR和IWP2处理。2026-06-22
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问：Wnt信号如何激活BrachyuryT启动子？
为了阐释Wnt信号对Brachyury T基因表达的调控作用，进行了Brachyury T基因启动子分析。2026-06-22
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问：心肌诱导分化模型如何成功建立？
本研究成功建立体外干细胞心肌阶段性分化模型，采用二甲基亚砜诱导P19小鼠畸胎瘤干细胞多步骤向心肌分化。2026-06-22
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问：蛋白质印迹分析实验流程是什么？
用冰预冷的PBS将细胞洗涤2次，刮取细胞至Eppendorf管中，5000r min离心5min收集沉淀。2026-06-22
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问：荧光素酶报告检测如何比较激活程度？
答：293T细胞铺板于12孔板中，通过Lipo6000™转染试剂过表达Brachyury T-Luc质粒，以pRL-TK作为内参质粒。转染24h，加药CHIR或IWP2各2026-06-22
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问：细胞转染实验具体如何进行？
293T细胞培养于含有10％胎牛血清、1％双抗的Dulbecco改良Eagle培养基。2026-06-22
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大会时间：2026/07/16
