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问:造血系统缺失后,细胞周期与存活状态是否保持正常?
在稳态条件下,CHAF1A缺失小鼠体内骨髓造血干祖细胞数目显著减少,而下游各造血祖细胞亚群数目未见明显改变。2026-08-10
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问:为什么说CHAF1A对成年小鼠HSCs的维持至关重要?
Poly诱导小鼠Chaf1a基因敲除,2周后,处死小鼠并开展表型分析。2026-08-10
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问:CHAF1A缺失为何会损害HSCs干性并促进其分化?
在排除细胞周期异常和凋亡异常的影响后,为进一步阐明CHAF1A缺失导致小鼠HSCs数目显著减少的潜在机制。2026-08-10
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问:如何对HSCs进行ATAC-seq测序分析?
流式细胞分选仪分选HSCs,每只小鼠分选10000HSCs。使用Hyperactive ATAC-Seq Library Prep Kit for Illumina试剂盒制备ATAC-seq测序文库。2026-08-10
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问:如何对HSCs进行转录组测序分析?
流式细胞分选仪分选HSCs,每只小鼠分选1000HSCs。使用单细胞全长mRNA扩增试剂盒对HSCs的mRNA进行扩增,扩增产物交由诺禾致源公司进行转录组测序。2026-08-10
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问:如何进行HSCs细胞周期分析?
参考1 4进行骨髓细胞HSCs染色,用BD Cytofix Cytoperm重悬并固定细胞,然后加入0 4%Triton X-100,室温孵育1min以增强通透性。2026-08-10
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问:如何通过流式细胞术检测细胞凋亡?
根据1 4制备小鼠骨髓细胞悬液,取1×107全骨髓细胞,100μL0 5%BSA缓冲液重悬细胞,加入5μL Lineage抗体混合物,置于冰上,避光孵育30min。2026-08-10
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问:如何通过流式细胞术分析骨髓、脾脏的成熟血细胞?
根据1 4制备小鼠骨髓细胞悬液,取5×105全骨髓细胞,50μL 0 5%BSA缓冲液重悬细胞,加入抗体混合物。2026-08-10
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问:如何通过流式细胞术分析骨髓造血干祖细胞?
以野生型小鼠作为对照组,Chaf1a基因敲除小鼠作为实验组,每组4~8只小鼠。2026-08-10
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问:如何使用Western blot检测骨髓c-Kit+细胞CHAF1A蛋白表达?
提取小鼠骨髓c-Kit+细胞总蛋白,经SDS-PAGE凝胶电泳分离后,将蛋白样本转印至PVDF膜。2026-08-10
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