为避免类器官中的细胞贴壁扁平化和促进细胞的自组织，利用表面经特殊处理的低吸附孔板是3D培养类器官广泛使用的方法，常用于干细胞自组织形成拟胚体、类器官初始形成和悬浮培养以扩增类器官等阶段。拟胚体是多能干细胞经无明确组织向导、自聚集形成的3D细胞团，通常是从多能干细胞生成各种类器官模型的第一步，常用的培养拟胚体的方法有以下几种。静态悬浮培养是最常用的拟胚体形成方法，具体步骤是将适宜密度的多能干细胞单细胞悬液接种至低吸附细胞培养板，使细胞在悬浮状态下自聚集形成拟胚体。
 

悬滴法将多能干细胞悬液以液滴形式悬挂于培养皿盖内或从悬滴培养板顶部载样，利用重力促使细胞在液滴底部聚集成团，形成拟胚体。离心法将细胞悬液加入U型/V型底孔板，经离心使细胞在孔底聚集形成紧密的拟胚体，该法形成的拟胚体均一性好且耗时短，但存在产量较低的缺点。此外，为获得更多数量的拟胚体，可以移至生物反应器通过持续搅拌或旋转保持细胞动态悬浮，以扩增促进细胞均匀聚集成拟胚体。
 

出自《类器官技术在非人灵长类动物中的研究进展》作者：何思源, 孙祥琳, 龙恩武。