scRNA-seq在乳腺细胞研究中的应用进展2025-10-09 09:03:19
单细胞RNA测序技术的实验流程包括以下关键步骤：首先是单细胞悬液制备，这一步需要将组织样本通过机械解离、酶消化等方法处理成单细胞状态，或者将液体样本离心取细胞沉淀，确保细胞的完整性和活性。接着进行单细胞捕获，可采用多种方法，如基于微流控芯片的液滴法、微孔板法等，将单个细胞精准地捕获到特定的反应体系中。捕获后的单细胞经逆转录得到互补DNA，逆转录过程需要特定的逆转录酶和引物，将细胞内的RNA逆转录为cDNA。最后对cDNA进行扩增，以增加DNA的量，以满足后续测序的需求。测序完成后，需要进行一系列下游分析，以确保数据的准确性和可解释性。首先，进行碱基检测，通过特定的算法和软件识别测序数据中的碱基。随后开展多重分离、比对及基因识别，将测序得到的短序列与已知的基因组序列进行比对，确定其在基因组中的位置并识别对应的基因。最后，通过数据可视化与解读，将庞大复杂的测序数据以直观的图表等形式展示出来，便于研究者分析和理解。
单细胞RNA测序技术已经在乳腺细胞研究中取得了显著进展，近年来，单细胞RNA测序技术在乳源细胞中的研究为揭示乳腺生理功能和细胞异质性提供了新视角。传统研究方法如显微镜观察、流式细胞术和批量RNA测序虽为乳源细胞研究奠定了基础，但存在明显的局限性。显微镜观察虽能直观地看到细胞形态，但无法提供分子水平信息；
流式细胞术能够分析细胞表面标志物，但对细胞内基因表达情况了解有限；批量RNA测序虽可提供基因表达谱，但掩盖了细胞间的异质性，无法反映单个细胞的特性。单细胞RNA测序技术的出现解决了这些问题，能够在单细胞水平上进行无偏倚、高通量、高分辨率的转录组分析，精确揭示每个细胞的转录组信息，并发现新的细胞类型。自首次报道单细胞RNA测序技术以来，Smart-seq、Drop-seq、10x Genomics等一系列技术的问世显著提高了单细胞RNA测序的通量和准确性，为乳源细胞研究提供了有力工具。
出自《单细胞RNA测序在乳源细胞中的应用研究与进展》作者任佳慧，张珍珍，罗昌俊。
