类器官培养中的Wnt信号通路调控2025-12-25 10:25:18
Miyoshi等建立了表达Wnt-3A和RSPO3的新细胞系L-WR作为L-WRN细胞的替代物,发现在这个系统中,Noggin对于维持来自小鼠胃、小肠、盲肠和结肠的球状体超过3个月不是必需的。Sato等试验表明,对于哺乳动物肠道类器官来说,生长因子Wnt3和RSPO1通过激活Wnt途径对类器官培养物的形成、发育和维持至关重要。为了更有效地强化这一核心信号,CHIR99021和组蛋白脱乙酰酶抑制剂的组合被证明是一种有效的策略。Oost等使用鸡源和鼠源的Wnt3和RSPO1对鸡和鼠肠类器官培养物进行培养,得出在补充有鸡源Wnt3和RSPO1的培养基中培养的鸡肠类器官显示球状体样结构的生长,其数量增加,表明鸡类器官需要鸡源的特异性生长因子Wnt3和RSPO1才能实现最佳生长。因此,不同物种肠道干细胞维持最佳的增殖和分化状态所需的相关物质不同。
肠道类器官的体外重建不仅依赖生化信号调控,其空间结构的形成需要仿生细胞外基质的物理支撑。目前主流的培养措施是采用具有生物黏附特性的基质材料模拟天然细胞外环境,其中源于Engelbreth-Holm-Swarm小鼠肉瘤细胞分泌产物的基底膜提取物Matrigel因其富含层黏连蛋白、蛋白聚糖及内源性细胞因子,可有效支持细胞极性形成与空间排布,因而成为三维培养体系构建的核心材料。然而,该材料的生物来源复杂性、成分异质性及批次稳定性缺陷,严重制约其在精准医学研究中的应用潜力。为突破上述技术瓶颈,研究着力开发组分可控的新型生物支架。近年来,成分明确、性能可调的天然和合成水凝胶材料成为构建三维培养体系的研究热点。
出自《肠道类器官体外培养及其应用进展》作者耿宁雨,杨奇奇,盛盈盈。
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