五加皮外泌体样纳米囊泡的体内分布与骨微结构检测2026-03-17 08:32:53
取俯卧位固定，以脊柱旁外侧约1 cm处为手术定位点，碘伏消毒备皮，沿定位点作1 cm纵行切口，逐层切开皮肤及皮下组织，钝性分离肌肉层暴露卵巢，结扎输卵管远端后切除卵巢，可吸收缝线逐层缝合。术后连续3 d皮下注射青霉素，监测体质量、摄食量及活动状态。实验大鼠分组如下：从SD大鼠中随机分配6只作为假手术组，仅切开皮肤及分离脂肪，保留完整卵巢+腹腔注射PBS；其余大鼠用于建立卵巢切除模型，并随机分为以下3组，卵巢切除组：腹腔注射PBS；低剂量五加皮来源外泌体样纳米囊泡组：腹腔注射0.5 mg/kg五加皮来源外泌体样纳米囊泡；高剂量五加皮来源外泌体样纳米囊泡组：腹腔注射5 mg/kg五加皮来源外泌体样纳米囊泡，术后1周开始给药，每周给药1次，持续干预12周，注射体积与频次保持一致。12周后，每组随机处死4只大鼠，收集股骨、小肠、肝、心、脾、肺、肾组织。为检测五加皮来源外泌体样纳米囊泡在体内的分布，采用DiR染料标记五加皮来源外泌体样纳米囊泡。将未染色和染色的外泌体样纳米囊泡经腹腔注射至卵巢切除大鼠体内。注射48 h后，麻醉状态下处死大鼠，收集小肠、肝、心、脾、肺、肾、股骨等主要脏器。采用双色红外激光成像系统进行离体组织荧光成像，激发波长750 nm，发射波长780nm，观察外泌体样纳米囊泡在骨组织及各脏器的定位与分布情况。
取固定于40g/L多聚甲醛中的右侧股骨远端样本，使用Micro-CT扫描仪进行扫描。设置参数为：分辨率15.6μm，电压70kV，电流114μA，扫描区域为股骨远端。重建三维图像后，应用CTAN分析软件测量骨密度、骨体积分数、骨小梁厚度、骨小梁间距及骨小梁数目等参数。
出自《五加皮外泌体样纳米囊泡促进人骨髓间充质干细胞成骨分化》作者钟焯岚，彭芝娜 ，田晓红。
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