牙源性间充质干细胞分离培养的技术挑战2026-05-08 08:44:04
虽然已有多种针对不同牙源性间充质干细胞的离培养方案,但迄今为止所描述的分离获得干细胞的不同方法都存在一些技术问题,仍需要开发一种简化且高度可复制的方法。获得牙源性组织与进行干细胞培养之间存在一个时间差,这个时间差的长短对于干细胞的成功培养及后续干细胞系的获得非常重要。Alkhalil等的研究发现,拔除后的牙齿在牙髓干细胞的分离过程中,牙髓获取与细胞开始培养之间间隔过长会导致干细胞死亡。此外,牙周膜组织、根尖周组织等牙周组织来源的干细胞也同样会因获取与培养间隔时间过长而出现细胞变性和死亡。拔除后的牙齿应当进行适当的消毒处理,这对获得有活性的牙源性间充质干细胞具有重要意义。在这个过程中,可以使用不同的液体,包括无菌生理盐水、聚乙烯吡啶酮碘和0.1%硫代硫酸钠等初步清洗,然后,在无菌PBS、含有抗生素的溶液、氯己定凝胶、葡萄糖酸氯己定、李斯德林漱口水和70%乙醇中进行再次清洗。由于活组织由三维结构构成,传统的干细胞二维培养具有局限性。近年来,类器官培养的发展已经成功地再现了三维结构,并向不同类型的组装发展。通过选择合适的干细胞培养条件或促分化方法,可以控制分化方向并促进其分化,从而在体外产生三维的牙髓样组织等。
例如,Huang等的研究发现,分离获取的牙髓干细胞可以在一定条件下被诱导分化为成牙本质细胞样细胞,并产生类似牙本质的矿物结构。关于三维培养方法,既往文献报道大多数研究基于二维培养细胞。三维球体或细胞聚集体培养的方案,相较于原有的二维培养技术,三维培养模式可以模拟促进再生的细胞外基质,利于细胞增殖、筛选合适的干细胞亚群,并且三维培养的干细胞具有更好的抗炎作用。
出自《牙源性间充质干细胞及相关要素在口腔组织再生中的研究进展》作者孟叶桐,李祥伟。
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