实际操作中，可将“消化不足-适度消化-消化过度”作为质量控制框架。消化不足的表现包括悬液中大团块较多、滤过后细胞回收率低、接种后细胞分布呈斑片状或局部堆积；此时可适当延长消化时间、增加轻柔吹打次数或优化去胶步骤。消化过度则表现为细胞碎片增多、台盼蓝阳性细胞比例升高、离心后沉淀松散、接种后24h贴附率低或细胞边缘收缩；此时应缩短酶处理时间、降低吹打强度，并在接种早期加入ROCK抑制剂以降低单细胞化引起的失巢凋亡风险。
 

对于药物吸收评价模型，可将细胞存活率、细胞团大小分布、滤过后回收率、24h贴附率、单层闭合速度和TEER动态曲线作为消化条件优化的核心指标，而不仅以“是否形成细胞悬液”作为判断标准。获得状态良好的单细胞或小细胞团悬液后，接种密度与包被基质的选择将进一步决定单层膜的均一性和屏障功能。接种密度和包被基质共同决定类器官来源细胞在平面支撑物上的贴附、铺展、闭合速度及屏障成熟质量，是3D类器官向2D屏障模型转化中最需要根据模型用途进行优化的参数之一。与传统细胞系不同，类器官来源细胞对消化程度、供体差异、肠段来源和基质条件更为敏感，因此不宜将某一固定细胞密度简单作为通用标准。
 

出自《小肠类器官来源屏障模型在药物吸收评价中的应用进展》作者张克霞，翟珊，张洲。