骨髓间充质干细胞的分离培养2022-01-18 09:32:38
19世纪德国病理学家科恩海姆提出骨髓中存在一种非造血间充质干细胞的观点,到了19世纪中叶Friedenstein的研究证实了骨髓间充质干细胞的存在。直到1991年美国生物学家卡普兰Caplan将其命名为间充质干细胞。为了作为科学研究的识别标准,2006年国际细胞治疗协会(ISCT)提出了定义人类间充质干细胞的最低标准:首先,间充质干细胞在标准培养条件下保持塑料黏附性;其次,间充质干细胞必须具有特异性表面抗原的表达,第三,间充质干细胞必须在体外分化为成骨细胞、脂肪细胞和成软骨细胞。根据剑桥词典,干细胞被定义为一种可以发育成任何其他类型的细胞。目前,很多学者认为骨髓间充质干细胞在体内的主要功能不是多能性,而是免疫调节和营养,因此在2010年和2017年首次使用间充质干细胞一词的论文作者卡普兰Caplan呼吁更名为药用信号细胞。还有些学者称其为间充质基质细胞,虽然名字不应该被认为是科学进步的障碍,但这些细胞临床效果的潜在预期可能会阻碍骨髓间充质干细胞在再生医学领域的作用。骨髓间充质干细胞是一种很有前途的细胞,体外可分化成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞等,其数量占骨髓单核细胞的0.001%-0.01%,这一比例会随着年龄的增长而降低,如何高效的分离骨髓间充质干细胞是未来组织工程发展进步的前提,但直到目前为止,还没有唯一的标志物可以对其进行识别和分离。骨髓间充质干细胞分离培养的方法有全骨髓贴壁法、密度梯度离心法、流式细胞仪分选法、免疫磁珠分选法、膜过滤方法及膜迁移法 等。流式细胞仪分选法和免疫磁珠分选法虽然能够分离出高纯度的骨髓间充质干细胞,但由于操作复杂、价格比较昂贵同时对细胞损伤较大,因此很多研究小组不把这2种方法作为首选。全骨髓贴壁法和密度梯度离心法虽然分离出骨髓间充质干细胞纯度不如以上2种方法,但操作简单、经济,是目前较为常用的分离方法,其中密度梯度离心法主要分为Ficoll、Percoll、Lymphoprep等离心法。
出自《骨髓间充质干细胞复合支架材料治疗骨缺损:研究现状及前景展望》作者池玉磊,卜宪敏,查玉梅。
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