圆窗途径是目前比较成熟的一种移植途径2022-06-28 08:44:53
内耳的结构非常精密且复杂,选择什么样的移植途径尤为重要。一条合适的途径不仅能保证细胞的高存活率、保持增殖分化能力,而且不影响机体正常的解剖结构与功能。目前用于iPS细胞内耳移植的途径主要有:圆窗、耳蜗底转以及子宫内注射。圆窗途径是目前比较成熟的一种移植途径,能既可靠又快速地将细胞注入耳蜗。目前用于实验的动物主要有豚鼠、小鼠和大鼠,通常于其耳后做一纵行切口,逐层分离,寻找面神经,并于面神经后方充分暴露听泡,开放听泡即可见圆窗龛及镫骨动脉,用微量注射器将细胞悬液缓慢通过圆窗注入即可。陈等将2周龄ICR小鼠进行感音神经性聋造模,4周后将iPS细胞经圆窗移植到Rosenthals管中,进行ABR测试发现,iPS细胞移植组的小鼠的阈值在术后8周开始呈稍降低趋势,术后12、16周,iPS细胞移植组的阈值与新霉素致聋组的阈值比较差异有统计学意义,但与正常之间也有明显差异。说明iPS细胞可以在体内存活长达16周,并可改善听力。Chen等将Oct4, Sox2, Klf4和c-Myc导入从正常人尿液中收集到的上皮细胞中得到胚胎干细胞样细胞团,即iPS细胞,然后将得到的 iPS细胞向内耳上皮祖细胞做进一步的诱导,并将iPS细胞与诱导得到的OEPs分别移植到NOD/SCID小鼠体内,他们发现,iPS细胞会形成畸胎瘤,但OEPs细胞不会生成畸胎瘤,说明经过进一步的诱导,干细胞的安全性得到了很大的提高。随后他们将得到的OEPs经圆窗移植到Slc26a4基因缺陷小鼠体内4周后发现,移植细胞具有迁移和分化为毛细胞的能力,以及位于 Corti器的移植细胞可以与天然SGNs形成突触连接。
Zhu等将iPS细胞移植到6-8周龄经感音神经性聋造模ICR小鼠体内后4周发现,用CM-Di1标记的iPS细胞在鼓阶、中阶、前庭阶以及蜗轴都可见,并同时表达神经元标志物巢蛋白,这说明iPS细胞移植入内耳后,增殖分化能力依旧良好。但是仍有2只小鼠(占实验组10%)的耳蜗内发现了畸胎瘤,这会影响听力的改善,甚至会影响其他的正常结构。尽管iPS细胞在移植后可以在宿主内耳中较好的生存,但是其成瘤性是移植后非常常见的问题,而将iPS细胞做进一步诱导后便能降低畸胎瘤的发生率,故将iPS细胞的诱导细胞经圆窗途径移植入耳蜗是不错的选择。
出自《诱导性多能干细胞内耳移植的研究进展》作者华荣恺,张志坚,华清泉。
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