TSE等用CD3nAb和CD28CD3nAb刺激PBMCs，与人骨髓MSCs共培养7d后，用3H-胸腺嘧啶核苷掺入法检测活化PBMCs的增殖情况，结果显示，MSCs 显著抑制了PBMCs增殖。本课题组已报道MSCs抑制CD3-mAb联合IL-2、IFNγ等活化的DC-CIK细胞增殖以及TNF-α等细胞因子的释放。在 hUC-MSCs 与 PBMCs 共培养体系中，预处理MSCs的培养体系类似单向混合淋巴细胞反应，其预处理方法常用的有细胞周期非特异性抑制剂丝裂霉素 C或60Coγ射线照射，目的是抑制其增殖而保留分泌生物活性物质的能力；如果不对MSCs进行预处理，其培养体系类似双向混合淋巴细胞反应。已有研究表明，MSCs抑制异体PBMCs增殖的能力不受MSCs是否接收预处理的影响，均可观察到MSCs有抑制PBMCs增殖的能力。
 

PBMCs包括淋巴细胞和单核细胞，以T淋巴细胞为主。获取PBMCs的常用方法是密度为1.077±0.0022的Ficoll-Hypaque（聚蔗糖-泛影葡胺，也称淋巴细胞分离液）密度梯度离心法，但获得的PBMCs中会混杂有约10％的其他血细胞。为获取纯度高的T淋巴细胞，可选用免疫磁珠、流式分选、亲和板结合分离、脱脂棉柱与尼龙棉柱等方法，但面临费用、技术平台等因素的限制。另外，当前由于国家法律法规对血源的管理，限制了实验室长期稳定大量获取健康个体人群PBMCs的来源，对于评价不同批次、相同批次不同代次MSCs的免疫调节能力时，面临结果重复性、可比性差的问题；因此有必要考虑建立健康人群永生化免疫细胞库的问题。
 

出自《人脐带间充质干细胞对异体人外周血单个核细胞的免疫调节作用》作者陈耐寒，赵仁彬，孙鷖。