荧光显微镜通过荧光探针增强了显微图像所包含的信息,因其灵敏度高，特异性强和技术简单而成为生物成像的强大工具。在过去的几十年, 多种类型的荧光检测技术被开发用于亚细胞结构分析、生物分子检测以及细胞内离子、温度等信息的研究。Bounab等基于微流控平台开发了一种高通量检测方法,实现了对数以万计免疫细胞的分泌动力学、活力、内吞性以及表面标志物的同时测量。荧光探针通常采用荧光蛋白、有机分子，荧光纳米颗粒等形式设计,许多荧光探针具有激发和发射光波长宽的特点, 这导致在多探针使用过程中容易产生相互干扰。
 

Martino等报道了一种涂有二氧化硅的半导体微腔探针,其发射波长光谱宽度比普通荧光探针窄100倍,这一特性极大地降低了探针之间的相互干扰,实现了对数千个密集标记物的跟踪识别。除探针设计,荧光显微镜技术也在不断发展,新技术实现了对传统荧光显微镜难以观察的细胞生理过程的分析。常见的技术有荧光漂白恢复技术、荧光共振能量转移以及荧光寿命成像,通过利用特定的荧光特性,开发适用于特定信息检测的荧光探针。例如,荧光寿命成像显微镜可被用来研究磷脂酰胆碱前药在细胞内的运输和代谢过程。
 

出自《细胞生物信息学及技术》作者顾宁,王方旭,李艳。