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培养体系的选择对体细胞重编程有着重要的作用2023-05-10 08:37:36

2021年,Kinoshit等在培养基中添加了低浓度的Activin A, XAV939和视黄酸受体拮抗物RARi,从E5.5的EpiSC中成功分离了处于Primed状态和Naive状态之间的一种胚胎干细胞,即Formative状态的细胞。它既有Naive状态和Primed状态的部分属性,又不同于二者,在骨形态蛋白的作用下可以在体外作为原始生殖细胞诱导的前体细胞,并且可以贡献至囊胚嵌合体。

培养体系的选择对体细胞重编程有着极其重要的作用。由于诱导多能干细胞和胚胎干细胞具有相似的多能性与自我更新能力,因此诱导性多能干细胞的培养体系通常借鉴胚胎干细胞的培养体系。在胚胎干细胞培养基的基础上,根据体细胞类型、特异性转录因子和诱导方式的不同来调整小分子化合物的添加。BOghOttl等4在无血清的CTFR培养基中衍生出了bESCs,并表示IWR1的添加对牛ESCs的生成至关重要。Xiang等通过LCDM培养基用牛成纤维细胞衍生出具有多能性和分化潜能的牛扩展潜能干细胞,并具有长期传代的能力。由于mTeSRl培养基由50多种成分组成,制备复杂且不易从商业来源获取,研究人员尝试用简化的NBFR培养基来替换饲养层和复杂的培养基,产生的牛ESC、也可保持长期的多能性。
 
在小鼠的研究中用KSR来替代胎牛血清可大大提高iPSCs克隆碱性磷酸酶染色,ALP的阳性率与iPSC质量。但Pillai等研究表明,在诱导牛胚胎成纤维细胞的培养液中使用KSR代替FBS, ALP阳性iPSC、克隆的形成则显著减少,这表明增强牛细胞重编程效率的条件可能与其他物种有根本性的差异。FBS可能不是限制biPSC、形成的关键因素,相反FBS中的某些成分对提高牛细胞的重编程效率至关重要。Rawat等在不同时间更换培养基来确定是否能提高牛胚胎成纤维细胞的重编程效率,结果表明在转导后第5天提供干细胞培养条件时重编程效率最高。
 
出自《牛诱导多能干细胞的建立及应用研究进展》作者曾虹,曾睿琳,付伟.