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碱性磷酸酶是成骨细胞早期分化的重要标志2023-05-17 09:05:14

骨组织工程主要由种子细胞、三维支架和成骨向诱导因子3部分组成。有研究表明,在新型生物活性玻璃材料、双相磷酸钙水泥、3D聚邝一磷酸三钙支架、3D日一磷酸三钙支架等生物材料中添加人牙髓干细胞,能提高成骨分化能力,在口腔领面外科骨缺损修复中具有良好前景。为了成功补偿骨缺损实现基于细胞的成骨修复,需要足够的干细胞或成骨祖细胞,因此必须进行细胞分离、体外扩增。该实验所用的人牙髓干细胞来自于临床拔除的第三磨牙和正畸牙,采用组织块培养及有限稀释法分离提纯后,镜下可见细胞体积较小,其形态呈长梭形,随之细胞增殖形成克隆集落,待细胞生长汇集时,细胞排列成典型的漩涡状,符合干细胞的高度增殖、自我更新能力的特点。流式细胞术检测细胞表面抗原,高表达间充质干细胞系标志物CD29,CD90,CD105,低表达造血干细胞标志物CD45,CD34,表明实验所培养的细胞是来源于中胚层的间充质干细胞。

细胞经成脂向诱导3周,油红染色后镜下可见细胞内红染的脂滴;细胞经成骨诱导2周,茜素红染色后镜下可见红染的矿化结节,表明实验所培养的细胞具有多向分化能力。综上所述,经组织块培养法培养所获得的细胞为人牙髓干细胞,与相关文献结果一致ys-zoo为了培养和扩增足够数量的干细胞,实验采用不同质量浓度的rhGH干预人牙髓干细胞,发现100, 250, 500,1000g/L rhGH均可以促进人牙髓干细胞的增殖碱性磷酸酶是成骨细胞早期分化的重要标志,其含量与活性可反映成骨分化的能力。工型胶原蛋白是早期成骨分化的标志,干细胞成骨分化将会出现工型胶原蛋白表达或合成增加,且胰岛素生长因子1可通过增加工型胶原蛋白表达与增强碱性磷酸酶活性,促进成骨细胞聚集以及分化。RUNX2是成骨分化的早期标志物之一,也是间充质干细胞向成骨细胞分化的标志。
 
出自《重组人生长激素促进人牙髓干细胞的成骨分化》作者孙菁.