干细胞及其来源外泌体的临床应用仍然面临许多问题。首先，干细胞和外泌体最佳移植时机和移植途径的方案仍有待优化。例如心肌内注射，由于心肌收缩、针刺部位渗漏等原因会导致干细胞在移植部位数量减少，从而影响其治疗效果。其次，由于干细胞的存活率受微环境和供体年龄、健康状况等影响，外泌体的含量和数量在不同的病理条件及病理进程中也不尽相同，其应用受到限制。第三，外泌体的分离纯化方法及标准仍有待进一步研究。目前，有多种方法用于分离纯化外泌体，如超速离心法、免疫磁珠法、差速离心法、沉淀法等，这些方法各有其优缺点，研究者通常根据自己的样本或实验方案选择合适的方法，但至今尚无统一的标准。且分离外泌体时通常需大量的样品，离心机转子类型、离心时间也会对外泌体的纯度和产量产生影响。最后，干细胞旁分泌系统中的生物活性因子或异质组分，如TNF-a可能对心脏组织造成副作用，且外泌体的功能miRNA可作用于多个靶点，对心脏产生保护作用的同时，可能会对心脏及其他组织器官产生不利的影响。
 

出自《干细胞及其来源外泌体对心脏衰老干预作用的研究进展》作者陈家蒙，刘滔滔，王雪.