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肾类器官已经在微流控芯片中血管化2024-03-25 09:18:37

dECM的制备需考虑从ECM中去除足够量的细胞碎片,并保留关键的ECM蛋白和维持结构特性。目前主要使用灌注法去除残留的宿主细胞,Kim等人使用Triton X-100处理肾脏得到肾脏dECM,利用肾脏dECM构建的肾脏类器官移植后,可以加速从宿主小鼠肾脏募集ECs。TritonX100灌注ECM可以保持生长因子和ECM的结构完整性,但不能充分去除细胞。而使用十二烷基硫酸钠的纯化方法已被证明能够充分去除细胞碎片,同时保持ECM的蛋白质。因此,使用Triton X-100和SDS的混合物也许可以达到细胞清除和ECM 维持的最佳水平。例如,Kitano等人用SDS、去离子水和Triton X-100连续灌注洗涤剂去除一段空肠的细胞,以制备大鼠肠dECM。然后将人源化多能性干细胞衍生的肠上皮细胞和HUVECs 与大鼠肠dECM共培养。体外培养28天后,人源化多能性干细胞衍生的祖细胞分化为极化的肠上皮单层,植入的HUVECs重建肠类器官的血流灌注,在离体灌注实验中,营养物质如葡萄糖和中链脂肪酸可实现从肠腔到脉管系统的转移。

微流控芯片通常又称生物芯片,是依托于微尺度下流体精确处理的跨学科技术。类器官微流控芯片可以把类器官培养过程中的实验操作过程和功能集成在一块小小的硅基、玻璃、塑料或金属等固相材质上,形成一种包括多种微纳米管道和多个微纳升体积的反应腔体的微型芯片,以可控流体贯穿整个系统,用以实现常规类器官的各种功能。微流控芯片中类器官的血管化主要是通过模拟体内细胞微环境来实现。例如,肾类器官已经成功在微流控芯片中血管化。Ryuji Morizane等人在毫流体芯片上流动培养hiPSCs分化而来的肾类器官,与静态对照组相比,流动条件下培养的肾类器官具有更多的血管化和更成熟的形态。
 
出自《血管化类器官的构建方法及生物材料》作者李石开,曾东鳌,杜方舟