五种流加培养基的优化筛选2021-11-23 08:58:56
干扰素α2b是一种用于病毒性疾病和肿瘤性疾病治疗的多功能细胞因子,因其在人体内的半衰期短从而限制其在临床上的应用。为解决这一难题,通过将药物蛋白与白蛋白融合,即可解决半衰期短的难题,又可提高其生物相容性、降低免疫原性,因而得到广泛应用。Novartis公司就此推广Albuferon药物,即干扰素α与HSA的融合药物蛋白,该药物在毕赤酵母中获得表达。但在进行临床研究时,两个志愿者得了肺水肿,其中一个患者死亡,因此该药物的申报工作也被终止。研究显示,毕赤酵母对药物的糖基化修饰与人体的糖基化修饰差异性和空间修饰的差异性是导致该药物毒副作用的可能原因。中国仓鼠卵巢细胞作为一种哺乳动物细胞,可在体外进行多次传代后仍可保持增殖能力,CHO细胞因其翻译后的修饰,所产生的蛋白免疫原性低,成为真核表达系统中最常用的哺乳动物表达系统,其中来自于CHO的与治疗有关的重组蛋白药物占生物药总量的比例已达到60%~70%。本研究室首次构建了能表达干扰素α2b和人血清白蛋白融合蛋白(IFNα2b-HSA)的CHO细胞株。在此基础上,通过对12种国产的商业化基础无血清培养基和5种流加培养基进行优化筛选,获得了最适合的培养方案,同时进了行5L一次性生物反应器的发酵放大,初步实现了IFNα2b-HSA融合蛋白在CHO 细胞中的高密度发酵。
出自《表达IFNα2b-HSA融合蛋白的CHO细胞培养基优化及发酵放大》作者蔡燕飞,李成媛,张晶晶。
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