不同培养方法与条件制备的CDM具有不同特性2024-11-11 08:25:09
CDM可以在二维或三维细胞培养条件下制备以适应不同应用需求。CDM制备过程包括细胞扩增、接种、ECM生成/沉积和脱细胞4个主要步骤。其中,ECM生成/沉积是最重要步骤,需要创造理想的培养条件,才能刺激细胞更快地分泌和沉积所需ECM。制备的CDM需要对其成份与结构进行表征,符合安全要求以后才能使用。一般来说,同种异体或异种细胞来源的CDM中DNA含量需保持在50ng/mg以下,以降低免疫原性反应风险。CDM最终的组成和功能与细胞的培养条件和方法、细胞来源以及脱细胞方法息息相关。通过系统优化内在因素(例如通过基因改造细胞)和外在因素(支架、培养基、生长因子和物理兴奋剂),可以实现最终CDM产品所需的物理和生化特性。细胞的培养条件与方法涉及培养基种类、培养平台、气体环境等。需要一定培养条件(如添加生长因子、旋转瓶生物反应器等)来控制细胞生长和ECM分泌,并根据需求选择合适细胞进行培养和扩增。除了一般的二维培养方法,三维细胞培养平台越来越受到人们关注。现有的三维细胞培养平台主要有中空纤维生物反应器、微载体(直径100~300μm,分为固体球形微载体和多孔微载体)、摇臂式生物反应器和滚筒式生物反应器。
这些三维细胞培养平台通常通过增大细胞附着表面积、促进培养基组中气体交换来显著提高细胞黏附密度,从而提高CDM的生产效率。具体使用哪种类型培养平台,需要根据细胞类型和使用需求选择。不同培养方法与条件制备的CDM具有不同特性(包括成分、形貌、刚度等)和生物功能。Zhang等研究了在普通生长培养基和成脂培养基中培养的脂肪干细胞构建的CDM对ADSCs的影响。
出自《细胞来源的脱细胞外基质用作组织工程支架的优势与展望》作者:杜志坡,廖婕,王冰冰.
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