外泌体广泛存在于各种体液及细胞培养基中，与微囊泡、凋亡小体及蛋白质聚集体等具有相似的物理化学性质，因此，一般的分离技术很难将其分离。目前常用的外泌体分离方法有超速离心法、超滤法、尺寸排阻色谱法、免疫捕获法、聚合物沉淀法以及微流控技术等。虽然外泌体分离方法不断发展，但大多数分离技术往往不能同时保证外泌体高纯度和高产率制备要求，且存在操作步骤繁杂、分离时间长、破坏膜状结构等问题。为此，该文综述现有外泌体分离纯化技术和鉴定方法，并阐述间充质干细胞外泌体在临床应用中的挑战和未来发展方向。
 

超速离心法因能够稳定地从几乎所有的样品中分离出纯度较高的外泌体而被当作外泌体分离的“金标准”，因其适用范围非常广泛、设备与操作的要求较为单一和外泌体纯度高，已成为实验人员首选的外泌体分离方案。超速离心法一般可以分为2类：差速超速离心法和密度梯度离心法。差速超速离心通过不同离心力和持续循环数，将外泌体与样品中其他密度和大小差异的成分分开；而密度梯度离心则是在其基础上使用2种或2种以上不同密度的分离介质（如蔗糖和碘二醇 ） 进行逐层分离。然而研究发现，长时间离心处理会使外泌体受到明显的机械损伤，虽然超速离心可以得到高浓度的外泌体，但它耗时较长，难以在短时间内处理多个生物样品，且对外泌体的损伤也不容忽视。此外，超速离心法的富集功能可能会使外泌体在制备过程中受到可溶性蛋白污染。
 

出自《间充质干细胞来源外泌体分离、鉴定技术及应用》作者:刘宇 ，龚森怡 ，杨丽华。