类器官的培养可以简单分为悬浮培养和依赖基质材料培养。随着类器官研究的发展，研究者发现类器官培养可借助一定的外部因素，如机械刺激等，促进类器官的发育。因此，借助外部因素进行培养也可归为类器官的培养方法之一。在本节中，我们对类器官的培养方法进行简要的分类和概述，包括悬浮培养、基质材料培养和外因刺激培养。悬浮培养是在低附着条件下，将干细胞团聚体置于具有低细胞黏附表面的培养板或模具上。这些细胞团聚体悬浮在培养基中，以3D的形式增殖、分化，继而形成类器官。目前已有报道利用悬浮培养构建了多种类器官。例如，将hiPSC加载至低粘附的96孔板中使其形成3D团聚体，通过培养基补充化学抑制剂和生长因子而调节WNT信号通路的激活或抑制，经15天培养获得了直径约1.5mm的心脏类器官。
 

类器官的培养通常需要3D环境，因此，依赖养方法。常用的3D培养基质材料为基质胶。然而，基质胶含多种未定义成分，批次间存在差异，这会导致所获类器官的重复性较低。此外，基质胶来源于小鼠肉瘤提取的体外培养物，可能引发临床安全问题。因此，人们开始转向可替代基质胶的3D基质材料，包括各种天然水凝胶、合成水凝胶以及经脱细胞处理所获生物组织的细胞外基质等。
 

出自《无机活性材料在类器官研究领域的应用》作者:马文平，韩雅卉，吴成铁.