问：细胞如何冻存与复苏呢？2022-01-18 10:35:51
答：为了尽最大程度保证细胞的活性以及复苏率，所有细胞的冻存和复苏均遵守“慢冻快融”的原则；细胞冻存：取处于对数生长期的细胞，按上述步骤消化成单个细胞，弃掉上清，加入适量的冻存液，充分混匀细胞并转移至冻存管中，在冻存管上标注细胞名称、冻存人和冻存时间，如果是干细胞要标注细胞代数。用封口膜封住冻存管口，放入冻存盒中进行程序性降温冻存，在-80℃冰箱中短期储存，或者是放入-80℃冰箱48小时后转移至液氮罐中长期储存，同时在记录表上记录好冻存信息及位置，以便后期方便查询获取细胞；细胞复苏：在超净工作台内，提前准备好装有完全培养基的离心管，从-80℃冰箱或液氮罐中取出要复苏的细胞冻存管，迅速放入 37℃水浴锅中并快速搅动使细胞悬液能以最快的速度融化；在超净工作台内，用75％的酒精擦拭整个冻存管；将融化的细胞悬液转移到预先准备好的离心管中，以300g离心5分钟，丢弃上清液，加入适量相应的完全培养基并转移至新培养瓶中，置于37℃含5％CO2培养箱内；次日观察细胞情况，若漂浮细胞较多，则弃去旧培养液换成新的培养液。出自《间质干细胞亚群及其胞外囊泡对卵巢癌和乳腺癌影响的研究 》作者李涛。
上一篇： 问：肿瘤基质细胞如何影响肿瘤细胞并促进肿瘤的发生呢？
下一篇： 问：滑膜间充质干细胞的应用在哪里？
