问:肿瘤成球怎样分析?2022-08-08 09:22:11
答:在人肺癌细胞A549状态良好时使用胰蛋白酶-EDTA溶液消化贴壁生长的各组细胞,在非粘附的24孔板中每孔接种500个细胞,然后在含有B27(20ng/mL)和表皮生长因子(10ng/mL)的无血清DMEM-F12培养基中培养。每两天后,通过添加新鲜的无血清培养基补充旧培养基,而无需去除旧培养基。培养14d后计数大于100μm的球体,每孔设置三个平行,并重复三遍。后续下游实验均采用体积大于100μm的肿瘤球。细胞球形成效率:SFE =每孔中直径大于100μm的细胞球的个数/每孔中原始接种细胞的总数。出自《HOXC10通过靶向调控CST1的表达对肺癌细胞干细胞样特性的作用研究》作者康建军,高乐,席俊峰。
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