问：怎样鉴定神经样细胞？2023-02-06 09:45:04
答：免疫荧光化学法鉴定:取诱导12d的细胞制成爬片，使用丙酮进行24h固定，使用PBS进行洗涤，2min/次，洗涤3次，孵育切片后，依次加入一抗、二抗，孵育期间注意避光，完成染色后使用甘油封片，并在显微镜下进行染色观察，拍片。免疫细胞化学法鉴定:在对人牙龈纤维细胞进行12d诱导后，制备细胞爬片，方法与上文中一致，分别加入鼠抗人胶质纤维酸性蛋白单克隆抗体、鼠抗人vimentin单克隆抗体及鼠抗人人微管相关蛋白（MAP）-2单克隆抗体，进行免疫细胞化学染色，记录染色结果。采用酶联免疫吸附试验对神经样细胞分泌功能进行测定:对诱导后的神经样细胞培养液及人牙龈成纤维细胞培养液进行测定，离心处理对照组细胞培养液（人牙龈成纤维细胞）及诱导组（神经样细胞）培养液，进行20min离心处理，转速3000r/min，按要求加样。取两组待测样品，分别设置12个样本孔，对待测样本进行稀释处理，在样本孔中加入酶标试剂，封板孵育，完成孵育后进行显色处理，测定吸光度，计算每组吸光度数值平均值，整理数据，对神经递质浓度含量进行计算。出自《牙龈成纤维细胞诱导分化神经细胞的可行性》作者石俊，关振群，王训霞。
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