问：BMSCs的分离及培养是怎样操作？2023-03-13 09:18:25
答：骨髓由健康献髓者捐赠，使用L-DMEM对采集的抗凝骨髓按照1∶5的比例稀释，然后使用Percoll分离液对其进行分离。具体步骤:首先在试管底部加入1.073g/ml的Per-coll分离液，然后将处理后的骨髓通过1∶1的比例缓慢滴加进试管，以2800r/min的条件对其离心30min，得到的单个核细胞使用L-DMEM洗涤两次后在含有10％胎牛血清的L-DMEM培养基中进行培养，培养时使用24孔板，规定浓度为2.0×105/cm2，放置于37℃，含有5％CO2的培养箱中，2d后将非贴壁细胞清除，其余细胞置于新鲜的培养基中，在细胞扩增到瓶底的90％融合时，使用0.05％的胰蛋白酶分解，并按照1∶1的比例对其进行传代，传代至2代以1∶2的比例进行传代培养。出自《miＲ-21通过调节TGF-β/activin信号通路影响人骨髓间质干细胞向成骨细胞分化的机制》作者刘晖,李熙,吴学军.
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