问：密度梯度离心法是什么？2023-08-14 10:22:43
答：主要是根据细胞的大小和密度进行分选。该方法先用磷酸盐缓冲液等体积稀释骨髓血，然后将稀释后的骨髓血与等体积的Ficoll淋巴分离液通过梯度离心（3000r/min，15min）获得不同类型的沉淀液。不同细胞根据其密度的差异分布在不同的高度上，红细胞以及多核细胞位于最底层（1.08g/mL），淋巴细胞分离液（1.08g/mL）位于倒数第二层，骨髓间充质干细胞、造血干细胞等单核细胞位于第二层（1.05~1.08g/mL），而血浆及其溶解物处于最高层（1.05g/mL。第二层为单核细胞层，该层细胞在颜色和形状上呈现出灰白色云雾状，在实际分离过程中，可根据操作的熟练程度，直接吸取第二层；或先去除第一层，再吸取第二层。将吸取的白色云雾状液体，用PBS洗涤后，倒入培养瓶中进行培养。通过贴壁法，进一步分离骨髓间充质干细胞。目前，由于梯度离心法为非破坏性分析，且操作简单性、可扩展性强，从而广泛应用于实验室高纯度BMSCs的分离。出自《骨髓间充质干细胞的分离、培养、鉴定及其在关节软骨损伤修复中的相关应用》作者刘少斐，许冰冰.
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