问：BoNT细胞检测法是什么？2023-09-18 09:49:43
答：CBPA反映了细胞BoNT中毒的所有步骤。近年来，通过对不同的细胞模型的研究已经成功开发出超过MBA灵敏度的CBPA。无论细胞模型的来源如何，所有CBPA均需要将细胞与BoNT孵育一定时间，然后除去BoNT后裂解细胞，最终定量测定BoNT生物活性。BoNT活性检测的特异性终点：①SNARE切割，并且该终点可用于任何神经元细胞类型。通过Western blot或ELISA在细胞裂解物中测定SNARE切割，简单概述了CBPA ELISA检测 BoNT/A 生物活性的过程。②构建SNARE融合蛋白，在SNARE底物多肽的两端携带荧光标签。该融合蛋白在细胞内被BoNT特异性切割后，采用共振能量转移方法检测荧光信号。③神经递质释放的抑制，特异性较低。用放射性同位素标记的去甲肾上腺素或甘氨酸加载细胞后孵育BoNT，细胞内SNARE被BoNT切割，通过测量释放的放射性元素分析BoNT 生物活性。目前，部分商业用 BoNT/A（2011年美国Allergan公司BOTOX®、2015年德国Merz公司XEOMIN®、2018年英国Ipsen公司DYSPORT®）的CBPA已得到药品监管部门的批准。出自《肉毒毒素细胞检测方法的研究进展》作者杨克娜,朱衍志，杨英超.
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