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问:什么叫流式细胞术?2024-06-24 10:34:02

答:GFP+细胞比例检测:取小鼠骨髓、肝脏、脾脏和外周血的单个核细胞各1×106个,用200μLPBSE重悬细胞沉淀, 加DAPI标记死细胞, 流式细胞仪检测GFP+细胞比例。造血干/祖细胞检测: 取5×107个骨髓单个核细胞, 用100 μL PBSE重悬, 加入流式抗体Lin–(CD3e、CD4、CD8a、TER-119、Ly-6G/Ly6C、B220、CD11b)-APC eFluor 780、c-kit-BV421、Sca-1-PE/Cyanine7、CD34-APC、CD135-PE、CD16/32-PerCP和CD127-PerCP各1 μL, 4°C避光孵育30min, 用流式细胞仪进行分析。

成熟免疫细胞的检测:取5×106个骨髓单个核细胞,用100μL PBSE重悬,加入流式抗体CD11b-PE、Ly6G-PE/Cyanine7、Ly6CFITC、CD3-APC和B220-APC/Cyanine7各1μL,避光孵育30min, 加DAPI标记死细胞,用流式细胞仪进行分析(除Lin–抗体购于ThermoFisher Scientific外, 其余均购自BioLegend)。
 
出自《棕色脂肪激活对机体正常和异常造血的影响》作者:成天然,邵雅,刘欢.