问：什么是蛋白质印迹法？2025-01-20 08:58:55
答;检测骨钙蛋白（BGP）、BMP3和AMBN的表达。将各组细胞按照每孔1×105的密度接种于6孔板，24h后换液，进行无血清培养基培养。24h后采用BCA法进行蛋白定量，各取30μL样品进行SDS⁃PAGE，再将蛋白转移至膜上，5％脱脂奶粉室温封闭1h，加入一抗为鼠抗BGP（稀释倍数1∶1000）、BMP3（稀释倍数1:1 000）、AMBN（稀释倍数1∶1000）和GAPDH（稀释倍数1∶1000），4℃孵育过夜。加入HRP标记的兔抗鼠二抗（1∶1000），37℃孵育45min，用ECL液显影，使用化学发光试剂盒在化学发光系统检测，随后结果采用Image⁃Pro Plus6软件进行图片条带灰度值分析，以待测蛋白与内参照GAPDH的灰度值比值作为蛋白的相对表达量。出自《青心酮通过诱导骨髓间充质干细胞成骨分化促进大鼠骨折愈合的机制》作者:史桂荣,任博文,张仲博.
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