问:什么是RT⁃qPCR检测BMSCs免疫表型?2025-01-20 09:07:14
答:表达整合素家族成员CD29和黏附分子CD44是骨髓间充质干细胞的重要标志物,体外分离培养大鼠BMSCs细胞,按照TRIzol试剂盒说明书提取各组细胞总RNA。SuperscriptⅢ逆转录酶用于合成cDNA模板。用SYBR ExScript qPCR试剂盒在以下条件下进行:95℃预变性2min,94℃变性15 s,55℃退火25s,在72℃延伸15s,进行33个循环。PCR产物经1% 琼脂糖凝胶电泳检测。依据2-ΔΔCt法计算各mRNA 样本相对表达量。出自《青心酮通过诱导骨髓间充质干细胞成骨分化促进大鼠骨折愈合的机制》作者:史桂荣,任博文,张仲博.
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