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问:Lenti ⁃ AMBN慢病毒载体的构建是如何形成的?2025-01-20 09:14:03

答:根据GenBank中成釉蛋白基因序列,采用Oli⁃go6.0软件设计引物,与单链DNAoligo一起由上海生工合成。5‘端引入AgeⅠ酶切位点,3‘端引入EcoRⅠ酶切位点,退火形成黏性末端双链。将该黏性末端双链与pLenti6. 3MCSIRES2⁃EGFP质粒载体进行连接,连接后的重组质粒Lenti⁃AMBN和对照Lenti⁃NC质粒转化DH5α感受态细胞,用SOC肉汤培养基培养,取菌液进行平板克隆,从转化的平板上挑取多个单克隆进行测序验证。

出自《青心酮通过诱导骨髓间充质干细胞成骨分化促进大鼠骨折愈合的机制》作者:史桂荣,任博文,张仲博.