问：什么是细胞免疫荧光?2025-05-12 09:22:08
答：将爬片贴于12孔板底部，再将真皮成纤维细胞按照4×103个/孔的密度接种在12孔板中，进行分组处理后，去除培养液，PBS洗涤2次，每孔加入500μL40g/L多聚甲醛室温固定10min，PBS洗涤3次，每孔加入500μL 0.1％Triton-X 室温破膜10min，PBS洗涤3次，加入5％BSA室温封闭2h，将爬片置于载玻片上，每片滴加PBS稀释的50μLⅠ型胶原蛋白、γ-H2AX抗体（1∶200）4℃孵育过夜，次日回收一抗，PBS洗涤3次，与荧光二抗在室温下孵育2h，PBS洗涤3次，每片加入50μLHoechst（1∶200）细胞核染料染色10min，PBS洗涤3次，最后在载玻片上滴加抗荧光淬灭剂进行封固，在共聚焦显微镜或荧光显微镜下观察。使用Image J软件进行荧光强度半定量分析。出自《α-酮戊二酸工程化小细胞外囊泡延缓皮肤衰老》作者:吴芷菁,李加利,张佳昕.
上一篇： 问;什么是活性氧荧光检测？
