问：不同年龄段BMSCs微环境中HERVK含量如何检测？2025-05-19 09:00:14
答：取不同年龄段人骨髓血浆样本，300×g/min离心10min，取上清液浓缩10倍，用Human HERVK_7p22.1provirus ancestral Env polyprotein（ERVK6） ELISA Kit检测不同年龄段骨髓血浆中HERVK6蛋白水平，将不同年龄段骨髓血浆样本在4℃条件下，3000×g/min离心30min，取上清，每孔加入100μL标准品和样品，用胶条覆盖，在37℃下孵育2h，弃去液体，每孔加入100μL1×生物素抗体，使用胶条封板，在37℃恒温培养箱中孵育1h，吸出每孔中的液体，用1×洗涤液洗涤3次，每次洗涤后完全去除孔内液体，每孔加入100μL1×HRP亲和素，用干净的胶条封板，继续在37℃的培养箱中孵育1h，弃去液体，向每孔加1×洗涤液清洗5次，之后每孔加入90μLTMB底物，用胶条封板，避光处理，在37℃培养箱里孵育15min，立即加入终止试剂，每孔50μL。使用酶标仪检测450nm处的吸光度值。出自《人骨髓间充质干细胞增龄衰老不依赖于内源性反转录病毒的介导》 作者:王亚萍,高天芸,王斌.
