问:什么是Westernblot?2025-06-09 09:18:16
答:将样本用RIPA裂解液溶解,在冰上放置30min,离心,取上清液,并使用BCA蛋白质测定试剂盒测定蛋白质浓度。使用凝胶电泳加载缓冲液将蛋白质样本稀释至相同浓度。SDSPAGE电泳后,转移膜在室温下用5%脱脂牛奶封闭1h,然后用CD81、TSG101、calnexin的相应一抗在4℃ 孵育过夜。生物素标记的山羊抗兔IgG(1∶10000)在室温下孵育2h,用 TBST洗3次,每次10min。采用ECL发光检测,凝胶成像系统显影分析。出自《脂肪间充质干细胞外泌体抑制特应性皮炎的作用机制》 作者:毕迦琦,王昭,王炳坤.
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