问：什么是胶原酶消化法？2025-06-09 09:25:45
答：收集小鼠腹股沟处皮下脂肪组织，１×ＰＢＳ冲洗３次。将组织浸入含２％的青霉素－链霉素溶液的１×ＰＢＳ中１０ｍｉｎ，中间连续摇晃，直至组织无血色。使用无菌眼科剪刀和镊子去除表面附着的毛细血管和薄膜。将脂肪组织切成约１ｍｍ３的小块；加入相同体积的０.１％或０.２％的Ｉ型胶原酶溶液。密封后，在３７℃水浴下将混合物消化３０ｍｉｎ。每隔５或１０ｍｉｎ摇晃混合物１次，将脂肪组织消化至糊状。然后通过７０或４０μｍ尼龙滤网过滤以去除组织残留物，离心，弃去上清液。用ＰＢＳ洗涤１或３次后，离心，弃去上清液。将细胞重悬于含１０％的胎牛血清的完全培养基中，接种于培养皿中。在３７℃，５％ ＣＯ２培养箱中培养细胞。４８ｈ后更换培养基，获得的细胞为原代ＡＳＣｓ。通过比较小鼠年龄、提取方法、Ｉ型胶原酶溶液的浓度、消化间隙摇晃时间、过滤筛网的规格及消化后ＰＢＳ洗涤次数来研究对细胞形态和数量的影响。
出自《脂肪间充质干细胞外泌体抑制特应性皮炎的作用机制》 作者:毕迦琦，王昭，王炳坤.
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