VEE复制子系统在犬iPSCs重编程中的优势与局限性2025-08-06 08:33:33
VEE复制子是一种与细胞mRNA相似的单链RNA，不使用DNA中间体，且具备可在细胞分裂过程中自复制的特点，因此既无基因组整合的潜力也无需多次进行转染。研究使用VEE复制子单次转染来自13岁老龄犬的皮肤成纤维细胞获得犬诱导多能干细胞；同时为减轻细胞暴露于VEE RNA所引起的强烈α/β-干扰素先天免疫反应，研究人员将VEE RNA复制子与B18R mRNA共转染，结果表明免疫反应被抑制且提高了转染效率。该研究结果存在局限性，即犬诱导多能干细胞传代培养仅实现5次连续传代，犬诱导多能干细胞也处于不完全多能性（过渡）状态。需要进一步的研究来建立完整的重编程并优化培养条件以维持长期培养，以及深入研究从过渡状态到完全多能状态的机制。基于OriP/Epstein-Barr核抗体-1的游离型载体在细胞质中可进行自主复制，不整合进入基因组且稳定表达；但由于质粒合成和分配缺陷，游离型载体在每代细胞中慢慢丢失。研究通过电转染游离型载体得到无外源基因残留的犬诱导多能干细胞，并能传代20次，但重编程效率最高仅为0.0002％。
虽然游离型载体是非整合、非病毒型的重编程方案，但重编程效率极低，仍需通过更多研究来验证其在犬诱导多能干细胞生成上的潜在应用前景。在将重编程因子递送进入细胞内之后，需要适当的培养条件来打开内源性多能因子表达通道，促进内源多能性基因表达。这一过程通过添加一些与细胞信号传导相关的蛋白激酶抑制剂和表观遗传调节剂等小分子化合物来完成，进一步提高了体细胞的重编程效率。
出自《犬诱导多能干细胞的研究进展与应用前景》 作者:高佳璇,高晨,李雨珏。
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