羊精原干细胞分离纯化技术研究进展2025-08-18 08:39:52
关于SSCs的判定有传统“As模型（Asingle）“和“断裂式“模式2种。在传统的“As模型“中，单个As细胞被认为是精子发生的干细胞，As细胞以对称或不对称2种方式进行分裂，对称会分裂成2个As细胞，而不对称分裂会分裂出1个As细胞和1个分化子细胞，该子细胞进一步分裂形成2个通过细胞间桥相连的Apr（A-paired）型精原细胞。Apr细胞再经过有丝分裂成Aal（A-aligned）型精原细胞，分为4链、8链、16链和32链，随后经有丝分裂后分化为A1、A2、A3A4、In和B型精原细胞，通过减数分裂后成精母细胞，最后经一系列分化成精子。由于当前尚未有标记物能真正意义上单独纯化出具有干细胞意义的As细胞，所以目前仍将AS、Apr和Aal统一认定为精原干细胞。2010年，Nakagawa等实验发现，As细胞并非同质的，只有其中的1个亚群才是SSCs。此外，Apr、Aal经过断裂后，会生成单个精原细胞并恢复干细胞潜能，该模式称为“断裂式“模式。目前，在畜牧领域中，仍以传统模式来对羊SSCs进行定义。通过酶消化法解离曲细精管组织，获得含生殖细胞和支持细胞的混合悬液，进一步利用差速贴壁法或重力沉降法等方法分离这2类细胞，最终纯化得到较高纯度的生殖细胞。有研究报道，采用复合酶进行分步酶解，结合机械分散的方法可获取睾丸单细胞悬液。
机械分离法通过物理剪碎和筛选的方式，初步分离出精原细胞，但该方法可能会造成细胞损伤。酶消化法则利用胶原酶、胰蛋白酶等酶类，通过消化睾丸组织，释放出单个细胞。结合使用这2种方法可以提高分离效率，减少细胞损伤，从而获得更高质量的SSCs。这些分离技术的优化为后续SSCs的体外培养和功能研究奠定了重要基础，同时也为畜牧育种和生殖医学研究提供了技术支持。
出自《羊精原干细胞体外培养及诱导分化的研究进展》作者：何宣辉，康丹菊，郑隆清。
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