DNAzyme是对RNA切割的DNAzyme2021-12-28 09:02:31
用于检测Pb2+的DNAzyme是发现最早的一种可以对RNA切割的DNAzyme,该酶只有在Pb2+存在的条件下, 才能表现出酶切活性, 因此, 可以用于检测Pb2+.这是一种用于检测Pb2+的酶链17E, 该链酶17E由催化中心（13个脱氧核糖碱基构成的茎-环结构和单链区域）和两侧的底物识别结构域构成. 当含有一个RNA碱基的底物链17S与酶链17E碱基互补配对后, 在Pb2+的存在下,底物链在RNA碱基处发生断裂.近年来, 已有学者基于Pb2+ DNAzyme设计并改进了Pb2+传感器.那是Lu课题组设计的第一代Pb2+传感器,其工作原理是:当5端标记荧光基团的底物链和3标记猝灭基团的酶链结合时, 荧光基团与猝灭基团相互接近, 荧光基团荧光猝灭. 加入Pb2+后, 底物链被切割成两段, 断裂后的底物链从酶链上解缔下来, 荧光基团与猝灭基团相互远离, 荧光复原, 据此可以实现Pb2+的定量检测. 但是第一代Pb2+传感器存在较大的背景荧光干扰和探针的合成难度高等问题,为了解决这些问题, Lu课题组和张晓兵课题组相继在此基础上设计了第二代、第三代和基于单链DNAzyme的Pb2+传感器. 改进后的Pb2+传感器不仅降低了检测体系的复杂性, 而且获得了较低的背景荧光。
出自《脱氧核酶在生物检测及基因治疗中的研究进展》作者范思思, 程进, 冀斌,。
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