L-DNAzyme显示出更好的生物稳定性2021-12-28 09:04:38
Cu2+DNAzyme是一种DNA-cleaving DNAzyme, 其切割作用需要在Cu2+的协助才能完成, 因此可以用于检测Cu2+. Lu课题组基于此Cu2+DNAzyme二级结构构建的Cu2+荧光传感器,该系统在底物链的5′端和3′端分别标记荧光基团和猝灭基团, 同时在酶链的3′-端标记猝灭基团. 在两个猝灭基团的共同作用之下, 大大降低了传感体系的背景荧光, 同时实现了Cu2+的低浓度检测（35nmol/L）. 为了进一步实现Cu2+高灵敏度、低探测限检测, Li等人基于如图3所示的Cu2+ DNAzyme, 对Cu2+ DNAzyme进行重构,他们将荧光分子/淬灭分子紧密的笼困在分子内的双螺旋结构中, 这种重构的结构不仅使得检测的荧光背景大大降低, 而且实现了对Cu2+更低浓度的检测（0.6nmol/L）. 此外,为了解决DNAzymes在生物体系中不稳定、易被降解的问题, 张晓兵课题组根据底物互惠特异性原则, 以特异性识别Cu2+的DNAzyme为参照序列, 设计了一种新型Cu2+依赖性L-DNAzyme, 用于复杂体系中Cu2+的检测. 结果显示, L-DNAzyme具有与D-DNAzyme相似的催化活性, 但在生物基质中显示出更好的生物稳定性, 实现了在细胞内5nmol/L。同Pb2+ DNAzyme类似, UO22+DNAzyme也是一种RNA-cleavage DNAzyme, 其切割作用需要在UO22+的存在下才能实现.UO22+ DNAzyme的结构与Pb2+ DNAzyme结构相近, Lu课题组用荧光基团和猝灭基团对底物链进行双标记, 用猝灭基团对酶链进行单标记,构建了高灵敏度、高特异性的UO22+荧光传感器,实现了对UO22+低浓度（45 pmol/L）检测。
出自《脱氧核酶在生物检测及基因治疗中的研究进展》作者范思思, 程进, 冀斌,。
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