DNAzyme用于细菌及肿瘤细胞检测2021-12-28 09:11:27
在过去的10年里, Li课题组开发了一种基于“标记荧光的RNA切割酶”的检测体系. RFD探针是一段DNA单链, 其中插入1个RNA碱基. RNA碱基两侧的核苷酸分别标记1个荧光基团和猝灭基团. 其检测机理是: 当RFD与特定的目标对象结合后, RFD构象转变成具有切割RNA活性的RNAcleaving构象, 使得荧光基团和猝灭基团分离,产生荧光信号,从而用于目标物的定性和定量检测.近年来, RFDs探针已经被用于实时检测细菌.Yousefi等人基于RNA-cleaving DNAzymes构建了荧光探针, 该荧光探针能够特异性识别并结合大肠杆菌, 使DNAzyme形成特定的二级结构, 激活DNAzymes切割活性, 释放荧光基团, 产生荧光信号, 实现了对食物中的大肠杆菌高灵敏度的特异性检测. 另外, RFDs探针还用于特异性识别肿瘤细胞, 与传统的检测方法相比,RFDs探针检测过程简单、耗时短、且特异性高.Li课题组构建的RNA-cleaving DNAzymes 荧光探针用于特异性识别乳腺癌细胞MDA-MB-231, 同样,DNAzyme特异性识别并结合乳腺癌细胞 MDAMB-231, 使DNAzyme形成特定的二级结构, 激活DNAzymes切割活性, 释放荧光基团, 产生荧光信号, 实现了对MDA-MB-231低浓度特异性检测(0.5μg/mL).另外,结果表明该RNA-cleaving DNAzymes荧光探针的定向切割作用有望进一步被用于乳腺癌的诊断和治疗。
出自《脱氧核酶在生物检测及基因治疗中的研究进展》作者范思思, 程进, 冀斌,。
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