在满足细胞基础代谢需求的基础上，如何精准调控干细胞命运的关键信号通路，则成为目前类器官培养体系构建的重点。Wnt信号通路的精确调控是类器官增殖和分化的关键。Wnt-3A作为经典Wnt/β-catenin信号通路的配体，直接激活下游β-catenin核转位，驱动干细胞自我更新与组织特异性分化，在脂肪来源的间充质干细胞的维持中不可或缺。
 

R-Spondin家族1～4通过结合Lgr4/5/6受体，抑制E3泛素连接酶环指蛋白43/锌指环指蛋白3对Wnt受体的降解，显著增强Wnt信号强度，其中hRSPO1在肠隐窝细胞增殖中表现出高特异性。小分子化合物糖原合成酶激酶－3β抑制剂则通过抑制糖原合成酶激酶－3β活性，阻断β-catenin的磷酸化降解，促进其核内积累并激活下游靶基因的表达。值得注意的是，CHIR99021与BMP抑制剂Noggin蛋白联用可进一步解除分化抑制，形成利于类器官长期培养的微环境。除 Wnt 信号通路调控外，生长因子的多维调控对类器官形态与功能重建同样至关重要。EGF通过激活PI3K/Akt和MEK/EＲK信号通路，直接促进肠道上皮细胞的增殖和隐窝－绒毛结构的形态发生，其促修复特性还可缓解培养过程中的物理损伤。
 

出自《肠道类器官体外培养及其应用进展》作者耿宁雨，杨奇奇，盛盈盈。