然后离心去除沉淀，将上层血浆转移至新的离心管中置于冰箱保存备用。将血细胞层用生理盐水稀释混匀，加至装有淋巴细胞分离液的离心管中。离心。吸取中间白细胞层，用PBS洗两次并计数，离心，弃上清后收集细胞沉淀，重悬后进行细胞计数，即得纯化的脐带血单个核细胞备用，采用CD34磁珠分选试剂盒从脐血单个核细胞中分选CD34+细胞与NK细胞无血清诱导培养基、自体血浆及经过致死量辐照的滋养细胞混合，置于培养瓶中培养。收集处于对数生长期的NK细胞。通过流式细胞术确认NK细胞纯度。
 

收集细胞上清液，通过切向流浓缩。在条件下，以不同转速分别离心，目的是去除死细胞和细胞碎片。接下来用滤膜过滤，最后在高速离心后收集沉淀，然后重悬于磷酸盐缓冲盐水中，保存在冰箱下备用。取稀释后的外泌体样本滴加到铜网上，静止后吸取多余液体，然后用醋酸双氧铀显影，最后用滤纸吸干残余试剂，自然风干，最后用透射电子显微镜观察形态。
 

出自《脐带血干细胞来源的NK细胞外泌体抗肺癌活性及初步机制探究》作者王晶晶 ，仝彩玲 ，颜涛玲。