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辐射与化学药物诱导体外衰老模型方法2026-08-27 08:47:29

Liu等使用SH2B紫外线辐射计产生的60J/cm2的中波UVB照射HaCaT细胞角质形成细胞,随后在含10%胎牛血清的DMEM培养基恢复培养24h,成功诱导皮肤体外衰老模型。Frediani等构建了SIPS模型,主要将接近衰老前期的正常人皮肤成纤维细胞培养物接种,培养至细胞汇合,然后使用GammaCell1000辐照仪,通过137Cs以146Gy/h的剂量率进行γ射线照射构建模型。辐射暴露,特别是电离辐射,会增加ROS的产生和DNA损伤。暴露于电离辐射可通过各种机制诱导细胞衰老。

通过该体外模型可以研究电离辐射如何引起细胞和机体的衰老,包括DNA损伤修复、氧化应激等方面的变化,有助于深入了解衰老的发生机制。与自然衰老相比,实验周期相对较短,而且实验条件可以精确控制,但是辐射剂量和照射方式等因素对模型的影响较大,需要进行优化和标准化。阿霉素作为一种蒽环类药物具有嵌入DNA双链体的能力,破坏DNA的复制与转录,造成DNA损伤,促使细胞周期停滞,进而诱导细胞衰老。MCF-7细胞在完全培养基中用50nmol/LDOX处理24h,处理后在无药物的培养基中孵育72h进行稳定,可以维持衰老的表型,从而完成DOX诱导体外衰老模型的构建。
 
将人心肌细胞AC16细胞维持在含有10%胎牛血清的DMEM培养基中,使用1.25、2.5、5μmol/L不同浓度的DOX处理AC16细胞24h,可有助于氧化应激和细胞衰老模型的成功构建。博来霉素是最常用的硬化剂之一,能产生多种生化效应,包括诱导细胞周期阻滞在G2/M期、引发细胞凋亡以及促使细胞核糖核酸降解。BLM已被用于构建一些严重的衰老相关疾病模型,如肺纤维化和真皮纤维化。研究人员将培养的人血管平滑肌细胞在含有50μmol/LBLM的生长培养基中培养3h从而成功构建衰老模型,导致DNA甲基化。H2O2也是重要的衰老诱导因子,因为ROS暴露引起的氧化应激会造成损伤。
 
出自《细胞水平体外衰老模型的构建策略与研究进展》作者刘建玲,李双,李京。