制备的疫苗可引起良好的免疫应答2022-02-15 09:29:21
PCV2病毒的高突变率导致其从PCV2a逐渐转变为PCV2b，再到现在全球流行的PCV2d。现在商业化PCV2疫苗的疫苗株均是PCV2a或PCV2b，其对目前流行的PCV2d毒株的保护效果，报道中存在争议。而且，美国和德国的多年临床数据显示，PCV2a亚型的疫苗使用后虽然PCV2a毒株分离率降低，但PCV2b毒株分离率大量增加，说明异源PCV2毒株的相互保护率还需要认真评估。因此，研究一种能同时预防PCV2各种基因型的通用疫苗，对PCVAD疫病的防控具有重要意义。PCV2 Cap蛋白是病毒的结构蛋白，含有病毒的多个中和表位，是其疫苗开发的重要候选蛋白。本研究中，我们参考了66个不同基因型PCV2的Cap蛋白氨基酸序列，设计了一种新型马赛克Cap蛋白，并将其诱骗表位删除后用一个Pan DR T辅助细胞表位进行替换以提高细胞免疫反应能力，密码子优化后在大肠杆菌BL21（DE3）中可高效、可溶性表达，重组蛋白在电镜下呈二十面体对称、15～20nm 的病毒样颗粒结构，表明设计的改构马赛克Cap蛋白可以正确组装，改变的氨基酸位点及引入的 Pan DR T 辅助细胞表位并不影响重组蛋白的正确折叠和自组装。
将改构马赛克Cap蛋白与Gel 01ST水性佐剂混合后制备成亚单位疫苗并免疫仔猪，制备的疫苗可引起良好的免疫应答，免后14d免疫组仔猪中即可检测到PCV2特异性抗体，攻毒后仔猪未检测到病毒血症，淋巴组织病理变化轻微且免疫组化显示腹股沟淋巴结中 PCV2 病毒含量很低，与攻毒对照组差异显著。特别是，改构马赛克Cap蛋白亚单位疫苗对PCV2 HeB-1株、PCV2 LN-3株均能达到保护效果，两者差异不明显，表明通过马赛克的方式制备PCV2疫苗，确实对 PCV2病毒起到良好的交叉保护效果，在PCV2通用疫苗开发方面具有重要的研究价值。Pan DR T 辅助细胞表位可提高动物机体细胞免疫水平，增强疫苗的免疫效果。本研究的表位替换表明改构马赛克 Cap 蛋白亚单位疫苗组与对照组相比，在免疫后14、21、28、35、42、49d 时，PCV2特异性IFN-γ-SC的数量显著增加。
出自《猪圆环病毒2型新型疫苗的研制及中和抗体快速检测方法的建立》作者侯竹美
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