单克隆抗体是指抗体由单个B淋巴细胞克隆所分泌，与多克隆抗体相比，其优点主要是具有针对抗原的特异性强、交叉反应不易出现等，在疫病诊断试剂开发、蛋白质表位鉴定以及靶向药物开发等方面具有重要意义。到目前为止，大部分的研究都集中在利用表达的Cap蛋白作为抗原制备针对PCV2的单克隆抗体，如Mahe等利用PCV2的病毒粒子作为抗原，用表达的Cap蛋白筛选制备出针对PCV2 的单克隆抗体。杨博超等利用表达的Cap蛋白作为抗原，筛选出多株PCV2的特异性单克隆抗体。本研究利用改构马赛克Cap蛋白作为抗原制备单克隆抗体。将纯化的改构马赛克Cap蛋白与弗氏佐剂乳化后免疫小鼠，并通过细胞融合、抗体效价检测和细胞亚克隆筛选等单克隆抗体制备程序，获得了15株改构马赛克Cap蛋白单克隆抗体。
 

选取制备的4株单抗进行深入研究，鉴定结果表明4株单抗均与改构马赛克Cap蛋白的发生特异性反应，且均与PCV2病毒产生特异性的免疫荧光信号，而与CSFV、PRRSV、PRV、PPV等四种猪常见病毒无特异性反应，证明2C5、4G7、5F7、6F8等4株单抗均为PCV2病毒的特异性抗体。Cap蛋白位于PCV2病毒表面，含有多个中和抗原表位，能够在病毒侵染宿主时产生中和抗体，且产生的中和抗体可对宿主提供完全保护。Liu等在单抗制备过程中发现，其获得的具有中和能力的单抗8E4仅与PCV2a亚型毒株发生反应，而与PCV2b亚型毒株无反应，进一步研究发现，造成这种PCV2病毒差异的原因是PCV2a与PCV2b毒株在其Cap蛋白的59位氨基酸不同，说明PCV2 Cap蛋白上单个氨基酸的差异就可改变其中和表位。本研究制备的单抗2C5仅与PCV2d亚型毒株发生反应，其也具有PCV2d病毒中和活性，但与单抗8E4不同的是，单抗2C5可与Cap蛋白发生western-blot反应，证明其应为Cap蛋白的线性表位抗体，而不是构象表位抗体。
 

出自《猪圆环病毒2型新型疫苗的研制及中和抗体快速检测方法的建立》作者侯竹美