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动物真正起到免疫保护作用的是中和抗体2022-02-16 09:06:22

当前PCV2在世界各地广泛存在,可引起猪的多种疫病,特别是其可侵染猪的淋巴器官,引起猪的免疫抑制,并常与PRRSV、CSFV、PRV 等病原混合感染,对养猪业造成重要经济损失。因此,建立快速高效的PCV2抗原抗体诊断方法,是最终根除该病的重要前提。

PCV2血清抗体的检测方法,目前已报道的有IFA、IPMA、间接 ELISA、竞争ELISA和阻断ELISA等。IFA、IPMA是经典的PCV2血清抗体检测方法,敏感度、特异性均较高,但相对操作比较繁琐,时间长,且对操作人员有较高的要求,在常规实验室的的推广应用存在困难。ELISA 方法具有易标准化、操作简便、敏感度高、可高通量检测等特点,是PCV2血清抗体水平检测的优选方法。
 
PCV2 血清抗体的间接ELISA检测试剂盒在国内已有商业化产品上市,常用于PCV2的流行病学调查与疫苗免疫后的抗体监测。由于猪群广泛存在的 PCV1、PCV3感染,以及蛋白纯化技术的限制,间接ELISA法检测血清抗体常出现假阳性现象。阻断 ELISA 由于引入了 PCV2 特异性单抗,相对来说特异性高于间接 ELISA。不论是IFA、IPMA法,还是间接ELISA、竞争ELISA和常规阻断ELISA,检测的都是总抗体,并不是中和抗体,而动物真正起到免疫保护作用的是中和抗体。黄立平等利用1个PCV2中和单抗1D2,建立了猪圆环病毒2型血清中和抗体阻断 ELISA 检测方法,可代替细胞中和试验用于血清中和抗体的检测,且敏感性约为细胞中和试验的3.1~6.2 倍。但此方法至今未见商业化产品上市。
 
本实验室在前期的研究中,成功制备1株PCV2单克隆抗体6F8,其对PCV2各种基因型毒株均具有中和作用,是一株广谱的PCV2中和单抗。本试验以改构马赛克Cap蛋白为包被抗原,以中和单抗6F8为阻断抗体,成功研制了一种猪圆环病毒2型血清中和抗体阻断ELISA试剂盒,其敏感性约为细胞中和试验的10倍以上,显示出了广阔的应用前景。
 
出自《猪圆环病毒2型新型疫苗的研制及中和抗体快速检测方法的建立》作者侯竹美