取第5代人脐带间充质干细胞，加入白细胞介素1β（终质量浓度10μg/L）孵育1d。CD4+ T细胞分选前 1 d，用 1 mg/L CD3 单克隆抗体包被24孔板，4 ℃过夜备用。采用 CD4+T细胞分离试剂盒从脐血单个核细胞中分选CD4+T细胞，向 CD3 单克隆抗体包被的24孔板中分别加入1×106CD4+T细胞、1.0 g/LCD28单克隆抗体（ 终质量浓度3 mg/L）、100 mg/L 白细胞介素2（终质量浓度100 μg/L）、5 mg/L转化生长因子β（终质量浓度 5 μg/L）培养2d。
 

白细胞介素1β激活的人脐带间充质干细胞与培养2d的 CD4+T细胞按1 ∶ 10 比例共培养（每孔1×105人脐带间充质干细胞 ），设空白对照组、阳性对照组、样本实验组和同型对照组，其中空白对照组和阳性对照组不加人脐带间充质干细胞，3d后收集CD4+T 细胞，向阳性对照组和样本实验组的CD4+T细胞中加入抗体：小鼠抗人 CD4-FITC、CD25-APC；向同型对照组的 CD4+T 细胞中加入抗体：小鼠IgG1-FITC isotype control、小鼠igG1κ -APC isotype control。破膜后，向阳性对照组和样本实验组的 CD4+T 细胞中加入小鼠抗人 FoxP3-PE抗体，向同型对照组的CD4+T细胞中加入小鼠IgG1κ-PE isotype control抗体。使用流式细胞仪进行样本数据收集和分析。
 

出自《人脐带间充质干细胞联合玻璃酸钠注射液治疗膝骨关节炎》作者崔晓燕。