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细胞标记及活体示踪技术2022-04-07 08:57:38

为实现对移植细胞的无创示踪,首先需要以一种能可视化的方式对细胞进行标记。细胞的标记及活体示踪技术在细胞移植研究中起着非常重要的作用,目前常用的细胞标记及示踪方法众多,主要分为两大类,即直接细胞标记法和间接细胞标记法。直接标记法是在细胞体外培养时应用放射性核素、磁性物质、荧光染料等显像剂直接标记细胞,然后采用正电子发射计算机断层成像、单光子发射计算机断层成像、磁共振成像和光学成像等手段进行成像。这些显像剂通过与细胞表面蛋白结合或被动扩散进入细胞内,与胞内的蛋白质结合,从而产生稳定的标记,然后再移植到宿主体内。这种方法不需要对细胞进行其他修饰,操作简单。

另一种为间接标记方法,通常依赖于一个报告基因,通过外源报告基因的稳定或瞬时表达将报告基因转染到细胞中,整合的报告基因在活细胞中转录和翻译,并最终转化为功能酶、受体或光学活性蛋白。然后表达的产物可被可成像的显像剂靶向结合并与合适的底物相互作用产生信号,再采用荧光成像、生物发光成像和核素成像等不同的成像方式捕获该信号。此时,报告基因表达的产物结合显像剂后成像,而不是报告基因本身被成像。因此是一种间接标记的方法。目前,最常用的报告基因有萤火虫荧光素酶基因、单纯疱疹病毒1型胸腺嘧啶激酶基因、Luc-2基因和碘化钠同向转运体等。每种方法各有其优缺点,选择的标记方法应具有特异性强、灵敏度高、对细胞或机体影响小、标记和检测方法简单易行等特点。综述近年来常用的细胞非临床活体成像方法及其在细胞治疗研究中的应用。
 
出自《细胞治疗产品非临床活体示踪方法研究进展》作者王舒哲,许波华,王雁。