单细胞测序显示单个细胞水平的基因表达2022-08-17 08:47:07
前期临床研究发现相同条件下体外培养的AF-MSC细胞表面标志物符合MSC要求,且传代后的细胞形态、染色体核型无明显改变。本研究对AF-MSC进行scRNA-seq,每个细胞检测基因中位数为5 971个基因,与文献报道的MSC的scRNA-seq结果相一致。对单个细胞中基因数进行统计结果显示,部分细胞基因表达数在2500个左右存在一个小的峰值,进一步对基因数为200~3000的细胞进行分析,结果显示细胞聚类为 7个亚群,且主要在亚群3(44%) 和亚群4(48%)中,结合后续分析结果,考虑亚群3可能为初步分化的细胞,亚群4类型暂无法确定。本研究证实细胞周期对聚类分群产生了影响:不同周期细胞在亚群的分布情况及GO通路富集结果显示,细胞周期对于亚群的影响较大,该结果与Huang等、Sun等的研究结果相似。同时我们对AF-MSC表面标志物的表达情况进行了分析,结果与既往研究结果相似。对于细胞表面标志物VCAM1,在DiTrapani等和Cananzi等的研究结果中有差异,而在我们的结果中显示在少量细胞阳性表达,提示单细胞测序可显示单个细胞水平的基因表达,可对基因表达情况进行更精确的判定。
综上所述,本实验结果与利用流式细胞术对AF-MSC的研究结果相吻合;且通过scRNA-seq对AF-MSC可以进行更细致的分群,为后续进一步研究AF-MSC的特征提供了研究基础。但本研究也有一定的局限性,由于纳入样本较少,且未进行后续实验验证,发现的结果仅具有一定的提示性,需要扩大样本量进一步验证。
出自《基于单细胞RNA测序的人羊水间充质干细胞异质性分析》作者郑玉婷,朱晓帆,杨宇霞。