高纯度和高质量的外泌体是实验开展的前提和基础2023-01-11 09:05:40
外泌体含有多种生物活性物质，如蛋白质（跨膜转运相关蛋白、热休克蛋白和TSPAN蛋白超家族等）、脂类 （胆固醇、双甘酯和鞘磷脂等）、核酸（DNA，miRNA，lncRNA，mRNA和tRNA等），因其来源及分泌机制不同，其表面标记物也有所差异，在不同的病理情况下，其标志物会发生显著变化，据此可以用于疾病的诊断。外泌体来源广泛，易于收集，且与源性细胞功能类似，因此在多种疾病中展现出良好的治疗作用。外泌体具备双层磷脂膜结构，能够在循环中保持稳定，内部负载物质不会轻易降解，且其活性在适当条件下能够长期保持不变，这是促使外泌体实现临床转化的重要前提。外泌体作为细胞外囊泡的最小亚型，具有良好的通过性（可跨越血-组织屏障），免疫排斥风险低，细胞靶向性强，故以外泌体为载体的药物递送系统在多个领域得到广泛研究。目前外泌体常见分离和纯化方法主要包括以下几种：超速离心法（金标准）、密度梯度离心法、超滤法、聚合物沉淀法、免疫磁珠法及试剂盒提取法等。高纯度和高质量的外泌体是实验开展的前提和基础，而不同的提取方法各具优缺点，研究者们要根据研究场景的不同，选取恰当的分离方法，确保后续实验的顺利开展。由于外泌体具备以上诸多优势，近年来人们逐渐开始发掘其在脊髓损伤修复领域的作用，目前已经开展了多项关于外泌体治疗脊髓损伤的临床前研究，并在动物模型上验证了这一结果。WANG等对脊髓损伤大鼠尾静脉注射间充质干细胞和等量同细胞源性的外泌体，发现二者均可降低神经胶质纤维酸性蛋白的表达，抑制A1星形胶质细胞的比例，从而发挥对脊髓损伤的神经保护作用；同时，间充质干细胞外泌体在病变部位被检测出，而损伤部位未检测到间充质干细胞，但两种方式发挥了相同的治疗效果，这至少证明在静脉给药方式下，间充质干细胞的增殖分化能力不是介导脊髓损伤治疗作用的主要机制，其发挥治疗作用可能来自于旁分泌所产生的外泌体，但不排除间充质干细胞中其他组分参与了治疗过程。其他研究者在类似的实验中取得了同样的结果，在损伤部位只检测到了静脉输注的间充质干细胞外泌体，间充质干细胞被发现可在肺部停留约2d，但二者均可特异性靶向损伤部位的M2型巨噬细胞，从而发挥对脊髓损伤的治疗作用。
出自《预处理方法改善外泌体在脊髓损伤中的作用》作者周禾山，谭龙旺，刘闯.
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