低氧预处理对于改善外泌体功能是一种简单有效的方法，可以显著提高外泌体治疗脊髓损伤的作用。但在低氧预处理过程中,不同的氧气浓度及处理时间是否会改变源性细胞的表型，从而影响所分泌外泌体的成分，还缺乏相关实验论证。并且，当前研究以低氧预处理为主，脊髓损伤后局部还会表现出强烈炎症、缺血及离子失衡等，构造相应微环境条件刺激下产生的外泌体，是否能改善疗效，目前暂无报道，KONG等 在实验中发现来源于脊髓损伤大鼠脑脊液的外泌体在体外可以促进神经元细胞增殖，而正常脑脊液外泌体无这一特征，但并未开展体内实验及挖掘相关分子机制，故模拟外部刺激的预处理方式在脊髓损伤中的作用还需进一步开展相关研究。
 

对源性细胞进行预培养，改变其培养方式和培养环境,是外泌体预处理的一项基本措施,常规外泌体培养方式产量低、耗时长，且间充质干细胞等无法无限制增殖，三维培养通过构建中空细胞生物反应器或球形支架等，可以促进细胞间相互作用，产生机械刺激，并促进细胞增殖和外泌体分泌，不仅有效提高外泌体产量，还能增强外泌体的生物活性，因此，构建先进的外泌体培养系统对于高质量大规模的外泌体生产是非常有必要的。调整外泌体培养过程中的氧含量，营造类似机体内部的低氧微环境,可以促使外泌体的生物活性物质发生改变，形成多个差异表达的内部成分，从而发挥积极的治疗作用，但过长的干预时间及过低的氧浓度,可能会抑制细胞活力，带来负面影响。同时，用凝血酶、过氧化氢及脂多糖等材料刺激亲代细胞，也可以提高外泌体的产量，丰富其内容物，但这些物质可能造成不健康的外泌体产生，利用生物刺激改变培养环境的外泌体预处理方法，相较于传统方式，能降低成本、提高产量，但可能导致的不良后果亦需重视。
 

出自《预处理方法改善外泌体在脊髓损伤中的作用》作者周禾山，谭龙旺，刘闯.