BP研究其对hDPSC成骨分化的影响2023-03-31 08:32:24
BP是一种呋喃香豆素类天然小分子化合物,有着类雌激素的生物效应。既往研究表明BP有抗炎、抑菌、调节免疫、防治骨质疏松等作用。研究显示BP通过抑制破骨细胞生成,促进成骨细胞增殖分化,以调节骨稳态的方式促进骨折愈合,减缓骨质疏松以及炎症导致的骨丧失。hDPSC与胚胎干细胞及诱导多能干细胞相比,有着取材方便、伦理问题少、冷冻损伤低等优点,并且拥有较高的分化潜能以及低免疫原性,被视为理想的种子细胞。本研究通过设置不同浓度的BP研究其对hDPSC成骨分化的影响,以期评估BP促hDPSC成骨分化能力并探究其促成骨细胞分化的最佳浓度。本研究采用胶原酶消化法从人第三磨牙中提取hDPSC,流式鉴定结果显示表面标志CD45和CD34均为阴性,间充质干细胞表面标志CD29、CD105、CD73和CD166为阳性,符合国际细胞治疗协会的间充质干细胞鉴定标准,证明此法所提取的细胞具有干细胞特征。干细胞的增殖与成骨分化是骨再生修复的重要环节。首先通过对0~240.0 μmol/L BP的生物毒性进行检测,发现当BP浓度超过60.0 μmol/L后,BP表现出对hDPSC增殖的抑制作用,因此在后续实验中使用 7.5、15.0、30.0μmol/L浓度的BP。生物安全性实验发现7.5、15.0、30.0 μmol/L BP对hDPSC的增殖无明显抑制作用,这些结果证实了对于hDPSC,7.5、15.0、30.0 μmol/LBP具有良好的安全性。
ALP表达于大部分矿化组织中,在成骨分化早期细胞的表面及基质小泡内呈现高表达。ALP可以增强无机磷酸盐在细胞外基质的局部沉积,同时减少焦磷酸盐的矿化抑制作用。ALP染色实验证实了一定浓度的BP可以促进hDPSC的ALP表达,之后的定量实验也印证了染色结果,并且15.0 μmol/LBP组的ALP活性增强最为明显。
出自《手柑内酯对人牙髓干细胞成骨分化的影响》作者丁浩南,严佳,唐诗佳.
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